關鍵詞:單克隆抗體制備服務|實驗技術服務
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單克隆抗體制備服務|實驗技術服務——pCzn1質粒+Arctic Express宿主菌低溫表達體系。
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測序實驗流程：
單克隆抗體用于臨床診斷和治療，目前研究較多的是抗人 T細胞單克隆抗體，用以識別人T細胞表面的不同抗原決定簇，有OKT系統(tǒng)及Leu系統(tǒng)。T細胞,特別是免疫調(diào)節(jié)T細胞(Ti/h及Tc/s細胞)對于調(diào)控免疫應答和維持免疫自穩(wěn)起著至關重要的作用,臨床上許多疾病的發(fā)生與免疫調(diào)節(jié)失常有關,因此，研究 T細胞在這些疾病中的變化，有助于探討病因和輔助診斷。
各種免疫缺損病、腫瘤或感染性疾病都與免疫功能低下有關，而變態(tài)反應性疾病、自身免疫性疾病等與免疫功能亢進有關。因此應用 OKT系列單克隆抗體檢測這些疾病患者外周血中T細胞亞群及T4/T8比值的變化，對探討發(fā)病機理，及時診斷疾病及監(jiān)測病情發(fā)展有十分重要的意義。
接受腎移植或骨髓移植的患者往往需應用各種免疫抑制劑以控制排斥反應， T細胞亞群的檢測有助于了解移植器官的排異和發(fā)展?？谷薚細胞單克隆抗體可用以治療白血病、移植物抗宿主反應(GVHD)和急性腎排斥等，目前尚處于摸索階段。
其原理是: B淋巴細胞能夠產(chǎn)生抗體， 但在體外不能進行無限分裂; 而瘤細胞雖然可以在體外進行無限傳代， 但不能產(chǎn)生抗體。將這兩種細胞融合后得到的雜交瘤細胞具有兩種親本細胞的特性。
一.提取合成專一性抗體的單個B淋巴細胞，但這種B淋巴細胞不能在體外生長。
二.應用細胞雜交技術使骨髓瘤細胞與B淋巴細胞融合，得到雜交瘤細胞。這種細胞既具有B淋巴細胞合成專一抗體的特性，也有骨髓瘤細胞能在體外培養(yǎng)增殖永存的特性
三.對雜交瘤細胞進行細胞培養(yǎng)，選出所需要的細胞群，體外或體內(nèi)培養(yǎng)，從培養(yǎng)液或動物腹水中提取單克隆抗體
單克隆抗體的提純
一般常用金黃色葡萄球菌蛋白A-瓊脂糖4B親和層析法。
單克隆抗體的保存 由腹水中獲得的抗體,經(jīng)離心去除細胞成分，再經(jīng)冷凍超速離心,取上清液加0.1%NaN3，少量分裝，冷凍于-70℃可保存幾年。 但應避免反復凍融,否則抗體失活，特別是IgM抗體。提純的單克隆抗體,冷凍干燥保存于2~8℃，取出時溶解后，保存于2~8℃，至少一個月內(nèi)可保持穩(wěn)定。腹水抗體也可冷凍干燥低溫(4℃)保存兩年，融化后放置4℃下保存一個月。短期使用的腹水抗體，4℃3~4 個月仍保持穩(wěn)定, 培養(yǎng)上清加0.1%NaN3，貯于-20℃，兩年不失活性。
特點:
一是特異性，針對特定的單一抗原表位，它具有高度的特異性，抗腫瘤抗體藥物的研究表明，其特異性主要表現(xiàn)為特異性結合、選擇性殺傷靶細胞、體內(nèi)靶向性分布以及具有更強的療效。
二是多樣性，主要表現(xiàn)在靶抗原的多樣性、抗體結構的多樣性、作用機制的多樣性等方面。
三是定向性，抗體藥物可以定向制造，就是根據(jù)需要制備具有不同治療作用的抗體藥物。