關(guān)鍵詞:細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)(Wound Healing)技術(shù)服務(wù)|實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)
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細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)(Wound Healing)技術(shù)服務(wù)|實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)——pCzn1質(zhì)粒+Arctic Express宿主菌低溫表達(dá)體系。
我們具備豐富的蛋白表達(dá)設(shè)計(jì)經(jīng)驗(yàn)及實(shí)驗(yàn)操作技巧，承諾客戶不成功不收費(fèi)。我們所有的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)真實(shí)可信，我們提供原始的表達(dá)菌株和克隆質(zhì)粒，客戶可以依據(jù)我們的實(shí)驗(yàn)報(bào)告重復(fù)我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
產(chǎn)品品牌：細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)(Wound Healing)技術(shù)服務(wù)|實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)   http://xyxwjj.cn/goodsid/fenleiyi/2868603/1.html
測(cè)序?qū)嶒?yàn)流程：
細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)（Wound Healing)是一種操作簡(jiǎn)單，經(jīng)濟(jì)實(shí)惠的研究細(xì)胞遷移/腫瘤侵襲的體外試驗(yàn)方法。這種方法的原理是，當(dāng)細(xì)胞長(zhǎng)到融合成單層狀態(tài)時(shí)，在融合的單層細(xì)胞上人為制造一個(gè)空白區(qū)域，稱為“劃痕”。劃痕邊緣的細(xì)胞會(huì)逐漸進(jìn)入空白區(qū)域使“劃痕”**。 基本的步驟包括“劃痕”的制造，細(xì)胞遷移期間圖像的獲得以及后期數(shù)據(jù)的處理。 
特點(diǎn)： 
1.  在一定程度上模擬了體內(nèi)細(xì)胞遷移的過(guò)程。
2.  非常適合研究細(xì)胞與胞外基質(zhì)（ECM），細(xì)胞與細(xì)胞之間相互作用引起的細(xì)胞遷移。
3.  與包括活細(xì)胞成像在內(nèi)的顯微鏡系統(tǒng)兼容，可用于分析細(xì)胞間的相互作用。
4.  研究細(xì)胞遷移的體外實(shí)驗(yàn)中*簡(jiǎn)單的方法。
實(shí)驗(yàn)步驟： 
1.  培養(yǎng)板接種細(xì)胞之前先用marker筆在12孔板背面畫(huà)橫線標(biāo)記（方便拍照時(shí)定位同一 個(gè)視野）。
2.  細(xì)胞消化后接入12孔板，數(shù)量以貼壁后鋪滿板底為宜（數(shù)量少時(shí)可培養(yǎng)一段時(shí)間至鋪滿板底）。
3.  細(xì)胞鋪滿板底后，用1 ml槍頭垂直于孔板制造細(xì)胞劃痕，盡量保證各個(gè)劃痕寬度一致。（人工槍頭制造劃痕難以保證劃痕寬度的一致性，影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果，這也是該方法*大的缺陷。）
4.  吸去細(xì)胞培養(yǎng)液，用PBS沖洗孔板三次，洗去劃痕產(chǎn)生的細(xì)胞碎片。
5.  加入無(wú)血清培養(yǎng)基，拍照記錄。
6.  將培養(yǎng)板放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)，每隔4-6小時(shí)取出拍照。
7.  根據(jù)收集圖片數(shù)據(jù)分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
流程：
1.先用marker筆在6孔板背后，用直尺比著，均勻得劃?rùn)M線，大約每隔0.5~1cm一道，橫穿過(guò)孔。每孔至少穿過(guò)5條線。
2.在空中加入約5X105個(gè)細(xì)胞，具體數(shù)量因細(xì)胞不同而不同，掌握為能鋪滿。
3.**天用頭比著直尺，盡量垂至于背后的橫線劃痕，槍頭要垂直，不能傾斜。
4.用PBS洗細(xì)胞3次，去處劃下的細(xì)胞，加入無(wú)血清培養(yǎng)基。
5.放入37度5%CO2培養(yǎng)箱，培養(yǎng)。按0，6，12，24小時(shí)取樣，拍照。
注意事項(xiàng)
1.  照相前一定要晾干，照相時(shí)將小室正置于載玻片上，在倒置顯微鏡下觀察、照相。
2.  使用 Matrivgel前應(yīng)從-20℃轉(zhuǎn)移至4℃待其自然溶化，避免反復(fù)凍融。
3.  使用時(shí)需接觸 Matrivgel的試管、移液吸頭等均應(yīng)預(yù)冷于4℃。